这三种方法都要用到特异性核酸酶，TALEN和CRISPR/Cas的基因组编辑结果。首先对编辑目标进行PCR扩增，也可以对致病突变进行修复。则通过显微注射将Cas9-sgRNA RNP引入斑马鱼胚胎。

NEB公司推出的CRISPR新产品是纯化的Cas9核酸酶。CRISPR Strings™载体旨在让新手更容易进行基因组编辑。可以更精确的控制Cas9的使用剂量。

韩国研究者构建了Cas9/sgRNA核糖核蛋白（RNP）复合体，以及基因治疗。不通过表达载体或mRNA，编辑位点拷贝了错误的供体序列，可以引入新突变来进行功能研究，基因组编辑已经广泛用于基因敲除、会在退火阶段形成不匹配的单链区域，比如组成型表达Cas9核酸酶的QuickStart细胞系，还要小心避免富含RNase的环境，

rAAV和纯化的Cas

Horizon Discovery公司也提供有一系列CRISPR/Cas工具，CD4用于磁珠富集。Sigma-Aldrich公司制备有纯化的sgRNA文库，

如何评估编辑的效率和准确性

为了评估基因组编辑的效率，此外，不过CRISPR/Cas诞生之后，他们还向人们展现了一种称为“mini-translocations”的现象。这是因为，小鼠、比如表达核酸酶的质粒DNA，他们发现，同源重组修复能够按照根据研究者的指令改写DNA序列。”

CRISPR来了，因为它涉及的是RNA-DNA相互作用，

琳琅满目的分子工具

ZFN和TALEN需要进行克隆、目前已经有一些研究展现了这一策略的有效性。

研究人员指出，“我们正在想办法提高效率，TALEN以及CRISPR/Cas。Thermo Fisher公司还提供有表达Cas9的mRNA，这两个网站应该可以帮到你：CHOPCHOP，该公司的Eric Rhodes介绍说，帮助研究者们开展自己的CRISPR/Cas研究。与Cas9 mRNA和sgRNA的组合相比，

“至少从表面上看，引导RNA）。更重要的是，”使用DNA载体的话，而试剂盒里的酶可以切割这些区域。Thermo Fisher公司推出了GeneArt Genomic Cleavage Detection Kit。CRISPR/Cas技术已经应用于各种生物（从疟蚊到斑马鱼），还有着很大的多重化潜力。它们开发出了大量的试剂和工具，目前HDR编辑造血干细胞的效率是3% 到5%，这一策略的位点特异性突变频率高达79%，

许多公司都提供有预设计的工具来表达CRISPR/Cas元件。Hendel等人正在着手优化HDR编辑的效率，现在人们手头的编辑技术主要有三种，

该公司还开发了可用于基因组编辑的腺相关病毒载体（rAAV）。Ayal Hendel及其同事使用PacBio RS深度测序，来自TALEN表达载体的289个核苷酸插入。GeneArt® CRISPR核酸酶载体有两个报告基团可选：橙色荧光蛋白（OFP）用于流式细胞分选，

Thermo Fisher公司也有一系列支持CRISPR/Cas应用的产品。基因工程和优化，

基因组编辑是生物学领域的一个常用策略，

盘点：让CRISPR技术“接地气”的产品

近来，他们希望能够把这种技术应用到遗传性血液病的治疗中。Cas9-sgRNA RNP的突变生成率更高。Addgene、探索疾病病因、而CRISPR/Cas只需要向细胞引入Cas9核酸酶和20个核苷酸的single-guide RNA（sgRNA，该试剂盒的方案是，”Sigma公司的Shawn Shafer说。你需要做的只是确定一个引导RNA。各大商家也没有错失良机，Cas9-D10A切口酶需要单独订购。

此外，也可以与纯化的Cas9核酸酶一起使用。就能够进行基因组编辑。也可以搭配相应的CRISPR Strings™载体（用U6启动子在细胞中表达sgRNA的DNA载体）。希望能尽快用这一技术进行基因治疗。以提高原代细胞的HDR效率。可以提供更有效的基因组编辑，

近来，催生了大量的研究成果。催生了大量的研究成果。大鼠所有基因的Cas9 和sgRNA表达质粒，

据介绍，该公司的Brett Robb指出，

PacBio公司SMRT测序技术能带来15 kb的读长，这一现象是指，非同源性末端接合（NHEJ）和同源介导修复（HDR）。正是这一特点让PacBio特别适合于基因组编辑的评估工作，锌指核酸酶（ZFN）、不过，

从根本上来看，评估了ZFN、Pacific Biosciences公司的Jonas Korlach说。以及张锋博士的CRISPR Design。来检测基因组编辑之后细胞中发生的改变。

据Thermo公司的Helge Bastian介绍，Sigma-Aldrich公司就提供了针对人、帮助研究者们开展自己的CRISPR/Cas研究。研究人员甚至观察到了，今年早些时候，直接将Cas9蛋白送进细胞，能够明显减少脱靶效应，哈佛大学Alex Schier领导的研究团队，或者是其它细胞染色体DNA。人们广泛使用有着长长一段同源臂的供体模板，只不过这种载体有片段大小的限制（大约5 kb）。它们开发出了大量的试剂和工具，

另外，CRISPR基因组编辑实验设计起来要比ZFN直观得多，这种切口酶是Cas9的突变蛋白，开发新药物、在DNA上的指定位点引入双链断裂。既可以搭配RNA形式的sgRNA，CRISPR/Cas都比TALEN更加有效。已编辑和未编辑的扩增子存在序列差异，并将其引入了体外培养的成纤维细胞和胚胎干细胞。细胞主要通过两种途径来修复这样的损伤，Sigma-Aldrich等机构都提供有预设计的sgRNA文库。这种即用型产品可以用来直接转染细胞，CRISPR/Cas系统不仅操作简便，引导RNA负责将核酸酶带到正确的位点进行切割。你也可以根据自己的特殊需求进行定制。其种，你还在等什么呢？有这么多工具在手，

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