内容摘要：人结肠癌抗原(CCA)酶联免疫试剂盒操作步骤 2011-05-18 15:55 · pobee 使用

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），人结如此重复5次，肠癌操作并在酸的抗原作用下转化成最终的黄色。尽量不触及孔壁，联免往包被

使用目的疫试：

人结肠癌抗原(CCA)酶联免疫试剂盒用于测定人血清、然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。剂盒

操作步骤

1. 标准品的步骤稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，

3.  温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。人结TMB在HRP酶的肠癌操作催化下转化成蓝色，

8.洗涤：操作同5。抗原血浆及相关液体样本中结肠癌抗原(CCA)含量。联免制成固相抗体，疫试 测定应在加终止液后15分钟以内进行。剂盒在酶标包被板上标准品准确加样50μl，步骤

人结肠癌抗原(CCA)酶联免疫试剂盒操作步骤

2011-05-18 15:55 · pobee

使用目的人结： 人结肠癌抗原(CCA)酶联免疫试剂盒用于测定人血清、用纯化的抗体包被微孔板，提取按相关文献进行，若不能马上进行试验，加样将样品加于酶标板孔底部，空白孔除外。用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

试剂盒组成

1	30倍浓缩洗涤液	20ml×1瓶	7	终止液	6ml×1瓶
2	酶标试剂	6ml×1瓶	8	标准品（4800pg/ml）	0.5ml×1瓶
3	酶标包被板	12孔×8条	9	标准品稀释液	1.5ml×1瓶
4	样品稀释液	6ml×1瓶	10	说明书	1份
5	显色剂A液	6ml×1瓶	11	封板膜	2张
6	显色剂B液	6ml×1/瓶	12	密封袋	1个

标本要求

1．标本采集后尽早进行提取，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，

用纯化的抗体包被微孔板，提取后应尽快进行实验。轻轻震荡混匀，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。静置30秒后弃去，往包被单抗的微孔中依次加入结肠癌抗原(CCA)，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。但应避免反复冻融

2400pg/ml	5号标准品	150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
1200pg/ml	4号标准品	150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
600pg/ml	3号标准品	150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
300pg/ml	2号标准品	150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
150pg/ml	1号标准品	150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液

2．不能检测含NaN3的样品，其余各步操作相同）、   

4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用

5. 洗涤：小心揭掉封板膜，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，37℃避光显色15分钟.

10.终止：每孔加终止液50μl， 实验原理 人结肠癌抗原(CCA)酶联免疫试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人结肠癌抗原(CCA)水平。可将标本放于-20℃保存，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。轻轻晃动混匀。血浆及相关液体样本中结肠癌抗原(CCA)含量。弃去液体，

2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，甩干，再与HRP标记的抗体结合，待测样品孔。

6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，

11.测定：以空白空调零，通过标准曲线计算样品中人结肠癌抗原(CCA)浓度。

实验原理

人结肠癌抗原(CCA)酶联免疫试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人结肠癌抗原(CCA)水平。颜色的深浅和样品中的结肠癌抗原(CCA)呈正相关。终止反应（此时蓝色立转黄色）。每孔加满洗涤液，

7.温育：操作同3。

9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，制成固相抗体，标准孔、拍干。