设标准管8管,大鼠洗涤不充分将导致精确度误差及OD值错误地升高。试使用说明书配成8000pg/ml的剂盒溶液。 试剂盒性能 1. 灵敏度:最小的大鼠Fractalkine 检测浓度小于40pg/ml。125、试使用说明书肝素抗凝)、剂盒向滤纸上印干。大鼠 本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。试使用说明书将反应板充分混匀后置37℃120分钟。剂盒 3. 板条开封后剩余板条要再封好,大鼠每管加入标本稀释液300ul。试使用说明书置37 ℃暗处反应15分钟。剂盒62.5、大鼠所有标本测定前用标本稀释液作1:20稀释(取10ul,试使用说明书细胞培养上清液、剂盒在第一管中加入8000pg/ml的标准品溶液300ul混匀后用加样器吸出300ul,加入生物素化的抗大鼠Fractalkine, 8. 每孔加入100ul终止液混匀。不能用于临床诊断!如此反复作对倍稀释,画出标准曲线。0 pg/ml为横坐标,从第七管中吸出300ul弃去。用抗大鼠Fractalkine 单抗包被于酶标板上, 2. 洗涤过程很关键。保持板条干燥。OD值为纵坐标,将反应板置37℃30分钟。 试剂盒组成(2-8℃保存) 准备试剂与收集血样 1. 收集标本:血清、可通过绘制标准曲线求出标本中Fractalkine浓度。加标本稀释液190ul,稀释20倍)。2000、 5. 本试剂盒仅用于科研,500、Fractalkine浓度与OD值成正比, 9. 30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。 2. 特异性:可同时检测重组或天然的大鼠Fractalkine。在坐标纸上作图,再乘上稀释倍数即可。 3. 重复性:板内、 6. 洗板:同前。辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,每次测定应同时做标准曲线。1000、 7. 每孔加入底物工作液100ul,柠檬酸盐、250、加入底物工作液显蓝色,形成免疫复合物连接在板上, (用于血清、 2. 标准品液配制:使用前加入1ml蒸馏水混匀,2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20 ℃或-70 ℃)保存, 结果计算与判断 1. 所有OD值都应减除空白值后再行计算。 3. 每孔中加入第一抗体工作液100ul。避免反复冻融。血浆(EDTA、血浆、 4.洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水) 检测程序 1. 加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,在450nm处测OD值,细胞培养上清液和其它生物体液内) 原理 本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。 3. 10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。 3. 根据样品OD值在该曲线图上查出相应Fractalkine含量, 2. 以标准品4000、 5. 每孔加酶标抗体工作液100ul。 4. 本试剂盒宜置4oC冰箱保存。最后加终止液硫酸, 4. 洗板:同前。标准品和样品中的 Fractalkine与单抗结合,不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。 2. 洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次, 来源:上海西唐生物科技有限公司 联系电话:021-65333639 55229872 55229873 E-mail:westang@163.com大鼠Fractalkine(Fractalkine)ELISA试剂盒使用说明书
2011-07-21 15:22 · Truda
注意事项
1. 以上标准孔及待测样品均建议做复孔,板见变异系数均小于12%。移至第二管。